第一：看线。天然的一线药师珠的线是自然形成的，它是一条完整、平整的线，而人工做的非天然的线会出现接口，有分叉。如果当然做工特别好的这点也难看得出。由于玛瑙硬度较大，所以做假的一线大家只要用利器或者直接反复划一下就应该可以鉴别出来，假的一线会出现划痕有甚者会直接脱落。
第二：看孔道。用强光手电照到孔道里面，天然一线药师珠的线是贯穿整个珠子的，所以从孔道里能看到中间的线。
第三：砸碎看。天然一线药师珠的线是“随珠子一块长大的”，并不是只在表面有线，所以砸开珠子就会明显看到生长在肉里的白线，人工在后天画上去的线只在表皮，肉里是没有的，画虎画皮难画骨，长在里面的的的线是仿不了的。
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